• 专业Co-IP检测服务

    k8.com提供高灵敏度、高特异性免疫共沉淀检测服务,已成功交付数千个Co-IP项目,涵盖蛋白质复合物鉴定、相互作用研究等应用

    免重链干扰技术 专业团队支持 快速交付

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    我们的服务优势

    为什么众多科研人员选择k8.com的Co-IP检测服务

    免重链干扰

    采用特异性二抗进行检测,有效避免抗体重链对结果的信号干扰

    高灵敏度

    优化的实验条件和技术流程,确保检测结果的灵敏度和可靠性

    严格质控

    每一步实验都经过严格的质量控制,确保数据的准确性和可重复性

    快速交付

    标准流程优化,缩短实验周期,快速交付高质量结果

    Co-IP检测服务介绍

    免疫共沉淀技术(Co-Immunoprecipitation, Co-IP)是研究两种蛋白在体内是否存在相互作用的有效方法。

    通过抗体和已知蛋白结合,从而捕获整个已知蛋白复合物,进而研究复合物中与已知蛋白存在相互作用的蛋白。

    k8.com提供专业的Co-IP检测服务,改进技术使用特异性二抗进行分子互作检测,能有效避免抗体重链对结果的信号干扰。

    质量保证

    我们承诺:若实验结果未达到合同要求,可提供完善的售后服务

    Co-IP原理图

    服务流程

    标准化流程确保实验结果准确可靠

    1

    接收订单及样品

    客户提交样品及相关信息,我们进行样品验收和登记

    2

    样品裂解液制备、定量

    制备样品裂解液,并进行蛋白定量,确保实验材料符合要求

    3

    样品、抗体、protein A/G-凝胶孵育

    将样品与抗体及protein A/G凝胶进行孵育,形成免疫复合物

    4

    沉淀收集、洗涤、制样

    收集免疫沉淀物,进行洗涤去除非特异性结合,制备样品

    5

    WB检测

    通过Western Blot检测目标蛋白及相互作用蛋白

    6

    结果交付

    提供完整的实验报告和数据解读,确保客户获得有价值的结果

    客户需提供

    为确保实验顺利进行,请提供以下材料

    样品要求

    • 细胞:2x10^7个细胞
    • 动物组织:不少于400mg
    • 植物组织:不少于2g
    • 需超低温处理并-80℃冻存,干冰运输

    抗体要求

    • 需检测的一抗(也可选择由k8.com提供)
    • 提供抗体信息:名称、种属、厂家、货号等
    • 如有特殊要求请提前说明

    服务说明

    服务名称 服务内容 交付内容及标准 服务周期(工作日)
    免疫共沉淀Co-IP 蛋白提取 1个样本 16
    Co-IP前wb 跑胶1个泳道
    Co-IP 富集2次:IgG、IP各1次
    Co-IP后诱饵蛋白wb 跑胶3个泳道:IgG、IP、input
    SDS-PAGE银染 跑胶3个泳道:IgG、IP、input 4
    质谱鉴定互作蛋白 质谱鉴定:IgG、IP 10-15

    成功案例

    众多成功案例,验证我们的专业能力

    Co-IP案例
    蛋白质相互作用验证

    通过Co-IP技术成功验证两种蛋白在体内的相互作用,结果为后续功能研究提供有力证据。

    (文献:Aberrant oligodendroglial LDL receptor orchestrates demyelination in chronic cerebral ischemia. 期刊:J Clin Invest IF:13.6)

    Co-IP案例
    蛋白质复合物鉴定

    利用Co-IP结合质谱技术,成功鉴定目标蛋白的相互作用网络,揭示新的生物学功能。

    (文献:PFN1 Inhibits Myogenesis of Bovine Myoblast Cells via Cdc42-PAK/JNK. 期刊:Cells IF:5.2)

    常见问题

    免疫共沉淀(Co-IP)技术主要用于:

    • 验证两种蛋白质在体内是否存在直接相互作用
    • 鉴定蛋白质复合物的组成
    • 研究信号传导通路中的蛋白质相互作用
    • 疾病机制研究中蛋白质相互作用网络的解析

    CoIP实验需要保证足够的蛋白浓度才能维持原本存在的蛋白互作状态,尤其当蛋白丰度较低、相互作用力不强、使用不易提蛋白组织等情况时。而且CoIP的实验条件往往需要反复摸索。因此用于CoIP实验需准备细胞>2x10^7,动物组织>500mg,植物组织>2g,并且须更加注意采集后速冻-80℃保存和避免反复冻融。

    a.所使用的抗体不仅需要优秀的亲和力、特异性,其识别表位还可能被互作蛋白所掩蔽(主要是使用单抗时);

    b.当蛋白互作须发生在特定生理代谢条件、组织细胞类型之中时,CoIP实验可能无法获得互作结果;

    c.如果诱饵蛋白和或捕获蛋白在样本中丰度很低时; d.两个互作蛋白的亲和力较弱;

    e.当该蛋白互作需要较特定的离子强度,或者需要如Ca2+离子/Mg2+离子/ATP等辅因子时,要创造合适的反应条件会变得困难;

    f.一些样品处理提取存在难度,提取足量目的蛋白与保持蛋白天然状态,需通过实验条件达到优化平衡;

    g.外源表达的标签蛋白存在同内源蛋白的位点竞争,这主要在使用标签抗体进行实验时可能存在。

    在CoIP-WB鉴定结果中,IgG组无目的蛋白条带、IP组有目的蛋白条带,说明IP过程成功;银染胶图中,IP组相对于IgG组有更多蛋白条带、且存在差异,说明CoIP过程捕获到互作蛋白;IP产物在质谱检测中鉴定到的蛋白数量不能作为判断实验成败的标准,因为这取决于目的蛋白本身所具有的互作蛋白数量、结合力强弱等方面;IP产物的质谱鉴定数量越多并不代表结果越好。

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    服务时间:周一至周五 9:00-18:00

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